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細菌的流式檢測FlowCytometricAnalysisofBacteria摘要:傳統的細菌檢測(如平板法和顯微技術(shù))耗時(shí)長(cháng)、誤差大、操作繁瑣并且無(wú)法提供細菌種屬和生物學(xué)狀態(tài)信息。近年來(lái),隨著(zhù)熒光染料、結構光學(xué)和流式細胞檢測儀自身的不斷發(fā)展,利用流式細胞術(shù)(FCM)檢測細菌等微生物成為可能。與傳統細菌檢測方法相比,FCM具有靈敏、快速、精確、高效的優(yōu)勢,同時(shí)結合其多參數數據采集特點(diǎn),FCM可提供多種細菌的生物學(xué)信息,在實(shí)驗室研究、臨床診斷、工業(yè)生產(chǎn)、環(huán)境監測等眾多領(lǐng)域具應用...
病毒的流式檢測FlowCytometricAnalysisofVirus摘要:流式細胞術(shù)(FCM)可通過(guò)分析受感染細胞來(lái)間接檢測病毒或其抗原,然而該方法存在測量過(guò)程繁瑣、耗時(shí)長(cháng)、誤差大等缺點(diǎn)。伴隨FCM的不斷發(fā)展,其檢測范圍已不再局限于細胞,目前已可利用流式細胞儀直接分析各類(lèi)形態(tài)和基因組大小各異(直徑范圍:100~200nm)的病毒,如桿狀病毒、帶狀皰疹病毒、HIV-1病毒等。跟病毒的其他檢測方法相比,FCM法具有重復性好、簡(jiǎn)便快速、可獲取多參數信息等優(yōu)勢。除此之外,FCM得...
qPCR熒光定量的基本原理就是在PCR擴增過(guò)程中,隨著(zhù)PCR循環(huán)數的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會(huì )相應的增加,這樣就可以通過(guò)熒光強度的變化來(lái)對PCR反應進(jìn)行實(shí)時(shí)的監測。通過(guò)對DNA或RNA的熒光定量PCR監測,實(shí)現基因的相對定量、定量和定性分析。qPCR熒光定量的生產(chǎn)工藝:產(chǎn)品品質(zhì)與生產(chǎn)工藝密不可分,先進(jìn)的制造工藝和高精度設備是產(chǎn)品品質(zhì)的前提,PCR實(shí)驗特別注重PCR材料的管壁厚度,需要超薄且管壁厚度均勻性非常一致,以保證加熱模塊的熱量均勻地傳導給PCR管內樣品,實(shí)現...
gibco澳洲胎牛血清源自潔凈的澳洲,從血源采集、加工到質(zhì)檢,整個(gè)過(guò)程遵循行業(yè)高標準,確保高產(chǎn)品品質(zhì)。澳洲是天然的理想血源地,每批牛血清均經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量控制和理、化、微生物指標的分析檢測,品質(zhì)可靠,適用于常規培養及原代細胞的培養。gibco澳洲胎牛血清是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集時(shí)間早,其胎球蛋白較多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量極低,并富含多種生長(cháng)因子,因此,是培養細胞為優(yōu)質(zhì)的牛血清。牛血清的成分復雜,主要包含蛋白質(zhì)、多肽、激素、氨...
流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡(AnnexinV/PI法)FlowDetectionofApoptosisbyAnnexinV/PI摘要:磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine,PS)又稱(chēng)復合神經(jīng)酸,位于正常細胞膜的胞質(zhì)一側,在細胞凋亡早期,PS可從細胞膜胞質(zhì)側翻轉到細胞膜外表面?;诖爽F象,利用Ca2+依賴(lài)性AnnexinV可與PS特異性結合,且親和力高,適用于細胞凋亡早中期的檢測。PI為一種核酸染色劑,與細胞核結合將細胞核染為紅色。PI不可透過(guò)正常的細胞膜,可透過(guò)凋亡...
摘要:細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。研究細胞增殖,對于理解細胞發(fā)育和分化,探索腫瘤發(fā)生和治療,以及評估細胞健康狀況和藥物安全性評價(jià)等都具有重要意義。在檢測細胞增殖的多種方法中,直接測定DNA合成是一種敏感并高精度的分析方法。5-溴-脫氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine,BrdU),是一種胸腺嘧啶核苷的類(lèi)似物。當細胞處于細胞周期中的DNA合成期(S期)時(shí),BrdU可以摻入到新合成的DNA中。利用抗BrdU的單克隆抗體熒光染色,就可通過(guò)流...
摘要:人外周血是容易獲取的人體樣本,在醫學(xué)類(lèi)科研工作中至關(guān)重要。如何大化、高效地觀(guān)察和利用有限的人外周血標本,通過(guò)一次實(shí)驗檢測得到更多的結果指標,對現有的實(shí)驗研究意義重大。因此本文主要描述如何進(jìn)行25色流式檢測及介紹相關(guān)分析方法,通過(guò)對單個(gè)細胞同時(shí)檢測25個(gè)參數,可以實(shí)現對外周血各種免疫細胞亞群的全景式描述,以及對某種細胞亞群的深度表型分析。關(guān)鍵詞:人外周血,亞群分類(lèi),25色流式分析材料與試劑材料:15ml離心管(Corning,catalognumber:430791)10...
流式細胞術(shù)(flowcytometery)是利用流式細胞儀(flowcytometer)對快速直線(xiàn)流動(dòng)狀態(tài)中的單列細胞或生物顆粒等進(jìn)行逐個(gè)、多參數、快速的定性、定量分析或分選的技術(shù),具有檢測速度快、測量參數多、采集數據量大、分析信息全面、分選純度高、方法靈活等特點(diǎn),可用于細胞大小、細胞顆粒度、DNA及RNA含量、蛋白質(zhì)含量、細胞特異抗原、細胞活性、胞內PH值、細胞周期、細胞凋亡、細胞功能分析等的檢測。自20世紀70年代以來(lái),隨著(zhù)流式細胞水平的日益提高,該技術(shù)已被廣泛應用于細胞...
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