qPCR熒光定量的基本原理就是在PCR擴增過(guò)程中，隨著(zhù)PCR循環(huán)數的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會(huì )相應的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強度的變化來(lái)對PCR反應進(jìn)行實(shí)時(shí)的監測。通過(guò)對DNA或RNA的熒光定量PCR監測，實(shí)現基因的相對定量、定量和定性分析。

　　qPCR熒光定量的生產(chǎn)工藝：

　　產(chǎn)品品質(zhì)與生產(chǎn)工藝密不可分，先進(jìn)的制造工藝和高精度設備是產(chǎn)品品質(zhì)的前提，PCR實(shí)驗特別注重PCR材料的管壁厚度，需要超薄且管壁厚度均勻性非常一致，以保證加熱模塊的熱量均勻地傳導給PCR管內樣品，實(shí)現實(shí)驗結果的準確性。

　　透光性

　　由于大多數熒光定量qPCR儀器的特性，光路需要從耗材的頂部傳導到管內參與反應，所以耗材的透光性需要特別的高。

　　密封性

　　管蓋跟管體的密封性能需要特別地好，以防止管內樣品的蒸發(fā)，避免交叉污染，保證實(shí)驗結果的正確無(wú)誤！

　　生產(chǎn)環(huán)境

　　有了精密的設備，潔凈的生產(chǎn)車(chē)間也非常重要，如果因為耗材不潔凈造成樣品的污染，實(shí)驗結果將非常不準確，排查原因耗時(shí)費力，嚴格的生產(chǎn)質(zhì)控可以確保各批次產(chǎn)品性能的穩定想，保證實(shí)驗數據的精確性和可重復性。

　　qPCR熒光定量具有以下技術(shù)優(yōu)勢：

　　1.實(shí)時(shí)監測：通過(guò)擴增曲線(xiàn)能夠實(shí)時(shí)監測PCR產(chǎn)物的積累。

　　2.特異性強：實(shí)驗完成后，溶解曲線(xiàn)的分析可以驗證擴增產(chǎn)物的特異性，降低假陽(yáng)性。

　　3.精確定量：利用擴增進(jìn)入指數增長(cháng)期的CT值來(lái)定量測定起始模板量，從而實(shí)現了極為精確的核酸定量檢測。