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一文搞定:qPCR熒光定量的生產(chǎn)工藝和技術(shù)優(yōu)勢

更新時(shí)間:2019-12-26瀏覽:842次


  qPCR熒光定量的基本原理就是在PCR擴增過(guò)程中,隨著(zhù)PCR循環(huán)數的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會(huì )相應的增加,這樣就可以通過(guò)熒光強度的變化來(lái)對PCR反應進(jìn)行實(shí)時(shí)的監測。通過(guò)對DNA或RNA的熒光定量PCR監測,實(shí)現基因的相對定量、定量和定性分析。
  qPCR熒光定量的生產(chǎn)工藝
  產(chǎn)品品質(zhì)與生產(chǎn)工藝密不可分,先進(jìn)的制造工藝和高精度設備是產(chǎn)品品質(zhì)的前提,PCR實(shí)驗特別注重PCR材料的管壁厚度,需要超薄且管壁厚度均勻性非常一致,以保證加熱模塊的熱量均勻地傳導給PCR管內樣品,實(shí)現實(shí)驗結果的準確性。
  透光性
  由于大多數熒光定量qPCR儀器的特性,光路需要從耗材的頂部傳導到管內參與反應,所以耗材的透光性需要特別的高。
  密封性
  管蓋跟管體的密封性能需要特別地好,以防止管內樣品的蒸發(fā),避免交叉污染,保證實(shí)驗結果的正確無(wú)誤!
  生產(chǎn)環(huán)境
  有了精密的設備,潔凈的生產(chǎn)車(chē)間也非常重要,如果因為耗材不潔凈造成樣品的污染,實(shí)驗結果將非常不準確,排查原因耗時(shí)費力,嚴格的生產(chǎn)質(zhì)控可以確保各批次產(chǎn)品性能的穩定想,保證實(shí)驗數據的精確性和可重復性。
  qPCR熒光定量具有以下技術(shù)優(yōu)勢
  1.實(shí)時(shí)監測:通過(guò)擴增曲線(xiàn)能夠實(shí)時(shí)監測PCR產(chǎn)物的積累。
  2.特異性強:實(shí)驗完成后,溶解曲線(xiàn)的分析可以驗證擴增產(chǎn)物的特異性,降低假陽(yáng)性。
  3.精確定量:利用擴增進(jìn)入指數增長(cháng)期的CT值來(lái)定量測定起始模板量,從而實(shí)現了極為精確的核酸定量檢測。
  

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