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由于co-IP相對問(wèn)題較多，以co-IP為例進(jìn)行介紹。Step1固定抗體Step2加樣Step3結合，去除非特異性蛋白Step4靶蛋白（紅色）洗脫或者互作蛋白復合物（紅色+黃色）洗脫Step5分析檢測—WesternBlot或者質(zhì)譜常用“黑話(huà)”上圖證明了EDR1和EDR4有相互作用。如果想要設計好實(shí)驗，讓我們先弄清以下“黑話(huà)”的意思吧。陽(yáng)性對照：證實(shí)細胞裂解物中確實(shí)存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白對（co-IP，比如誘餌蛋白X和靶蛋白Y），即為常說(shuō)的input?？芍苯尤〕楹玫牡?..
某個(gè)實(shí)驗間隙…萌新：開(kāi)題報告已提交，轉眼1個(gè)月過(guò)去了，實(shí)驗還是一頭霧水，為啥我的co-IP拉不下來(lái)蛋白？奮斗中的師兄：我當初正好相反，拉下來(lái)的蛋白被抗體條帶覆蓋住了，換個(gè)抗體忒不好找，無(wú)奈換了個(gè)蛋白，還好挺順利。久經(jīng)沙場(chǎng)的大師兄：蛋白吧，不但種類(lèi)多，理化性質(zhì)差異較大，關(guān)鍵它們又喜歡組隊在細胞里干活，co-IP又是常用的手段，掌握好這個(gè)工具還是很重要的，總不能隨隨便便就換個(gè)蛋白。IP、co-IP、pull-down簡(jiǎn)介IP(Immunoprecipitation)，免疫沉淀：是...
活細胞熒光成像往往需要更長(cháng)時(shí)間的觀(guān)察和拍攝，對熒光信號的持久穩定要求更高。這就需要研究者要選用更明亮更穩定的熒光染料，如Invitrogen™MolecularProbes™熒光標記試劑，同時(shí)盡可能優(yōu)化實(shí)驗條件。除此之外，提高活細胞成像的信噪比還可通過(guò)使用能減少細胞外背景熒光或增加標記熒光染料光穩定性的試劑進(jìn)行信號優(yōu)化。降低背景熒光活細胞成像實(shí)驗中非常重要的一點(diǎn)是需要在專(zhuān)門(mén)的培養基中進(jìn)行成像。常規培養基含有酚紅可淬滅可見(jiàn)光波段的熒光染料，或含有自發(fā)熒光...
巨噬細胞是先天免疫系統的一種特殊的、長(cháng)壽命的吞噬細胞。巨噬細胞是三種吞噬細胞類(lèi)型之一，還有粒細胞（中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞）和樹(shù)突狀細胞（DCs）。大多數病原體通過(guò)呼吸道、腸粘膜、皮膚病變或泌尿生殖道進(jìn)入宿，NOI個(gè)遇到的就是在粘膜下組織中的巨噬細胞，它們通常是NOI個(gè)遇到病原體的防御細胞。一旦微生物進(jìn)入宿主并開(kāi)始復制，它就被其中一種吞噬細胞所識別，并被吞噬形成吞噬溶酶體，然后再經(jīng)過(guò)酸化和酶處理，產(chǎn)生高活性一氧化氮和超氧自由基來(lái)殺死病原體，這一過(guò)程稱(chēng)為吞噬作用。...
細胞自噬（Autophagy）對細胞正常行使功能至關(guān)重要，涉及細胞穩態(tài)、發(fā)育、細胞死亡、應對侵入等，各種自噬相關(guān)研究也一直備受關(guān)注。自噬早提出于20世紀60年代，在2016年，諾貝爾生理學(xué)和醫學(xué)獎授予了在自噬性溶酶體研究作出貢獻的日本分子細胞生物學(xué)家大隅良典（YoshinoriOhsumi）。在疫情來(lái)襲，科學(xué)家爭相探尋有效治療藥物時(shí)，也有研究者關(guān)注細胞自噬和病毒感染的關(guān)聯(lián)。超博推薦-賽默飛品牌-可提供一系列關(guān)于細胞自噬及其機制研究的工具，包括Invitrogen™...
SERANA胎牛血清（FBS）名稱(chēng)：德國SERANA胎牛血清FetalBovineSerum貨號：S-FBS-EU-015規格：500ML品牌：德國SERANA血源：USA儲存溫度：-20°C運輸方式：充足干冰+泡沫箱+紙箱，誠信快遞超博科技血清常備，即日可發(fā)貨，充足干冰，順豐快遞運輸，售后保證，歡迎訂購美國源透析胎牛血清，細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否...
一、ELISA試劑盒的注意事項：1、嚴格按照規定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫標準。使用后立即冷藏保存試劑。2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。4、底物顯色液應呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。6、在儲存和溫育時(shí)避免強光直接照射。7、平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板...
Q1.哪些細胞可以培養于去外泌體的FBS中,我又該使用何種FBS濃度?我們專(zhuān)門(mén)測試了Jurkat.MCF-7、HeLa、PC3、HEK293與A549細胞,所有這些種類(lèi)的細胞都生長(cháng)良好。HeLa細胞對于去外泌體FBS的存在敏感。您可能需要對去外泌體FBS的濃度進(jìn)行調整,以匹配特定細胞系與培養系統的需要。我們推薦您以10%做為去外泌體FBS應用的起始濃度,在需要時(shí)進(jìn)行上調或下調。同時(shí),去外泌體FBS通過(guò)了單次傳代后48小時(shí)的培養測試和驗證(我們也成功完成了對Hela、MCF-7...
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