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你知道這些細胞自噬標記的好工具嗎?

更新時(shí)間:2020-11-23瀏覽:1319次

       細胞自噬(Autophagy)對細胞正常行使功能至關(guān)重要,涉及細胞穩態(tài)、發(fā)育、細胞死亡、應對侵入等,各種自噬相關(guān)研究也一直備受關(guān)注。       自噬早提出于20世紀60年代,在2016年,諾貝爾生理學(xué)和醫學(xué)獎授予了在自噬性溶酶體研究作出貢獻的日本分子細胞生物學(xué)家大隅良典(Yoshinori Ohsumi)。在疫情來(lái)襲,科學(xué)家爭相探尋有效治療藥物時(shí),也有研究者關(guān)注細胞自噬和病毒感染的關(guān)聯(lián)。

     超博推薦-賽默飛品牌-可提供一系列關(guān)于細胞自噬及其機制研究的工具,包括Invitrogen™ Molecular Probes™ 的p62及LC3B特異標記染料用以研究自噬活性,使研究人員對細胞自噬與泛素降解機制之間的聯(lián)系進(jìn)行深入研究,用于追蹤溶酶體并入自噬體的過(guò)程,還可以檢測蛋白質(zhì)從合成到通過(guò)自噬途徑聚集和泛素化的全過(guò)程等。

使用LC3B追蹤自噬過(guò)程

LC3B可從細胞質(zhì)基質(zhì)中獲得,并與早期自噬過(guò)程中的吞噬泡形成有關(guān)。這種定位信息可作為自噬膜的常用標記,還可監控其發(fā)展變化的過(guò)程,實(shí)現:

? 活細胞及固定細胞中的自噬追蹤及定位

? 對含LC3B的囊泡進(jìn)行實(shí)時(shí)pH監控

? 定量分析LC3B的聚積

Premo Autophagy Sensor LC3B-RFP (紅)標記U2OS細胞

 

使用p62追蹤選擇性自噬過(guò)程

p62可作為將要被自噬作用降解的小泡的受體,也可作為要被清除的泛素化蛋白聚集物的受體。p62蛋白可結合泛素,也可與LC3結合,從而靶向自噬體并促進(jìn)泛素化蛋白的清除,可以進(jìn)行:

? 活細胞中的p62追蹤

? 與細胞標記同時(shí)使用進(jìn)行多色分析

 A549細胞中 p62陽(yáng)性小泡沿微管分布圖像

 

溶酶體定位和追蹤

溶酶體與隔離細胞膜融合從而形成自噬性溶酶體,可作為在降解前追蹤自噬性溶酶體融合的有效工具,而具有細胞滲透性的LysoTracker染料僅需毫微摩爾級濃度即可標記并在溶酶體內部定位酸性細胞器。

? 對酸性細胞器具有高度選擇性

? 多種熒光顏色可供選擇

? 可與其他熒光染料或蛋白同時(shí)使用進(jìn)行多色分析

 使用LysoTracker Deep Red共定位HeLa細胞

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