巨噬細胞是先天免疫系統的一種特殊的、長(cháng)壽命的吞噬細胞。巨噬細胞是三種吞噬細胞類(lèi)型之一，還有粒細胞（中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞）和樹(shù)突狀細胞（DCs）。 

       大多數病原體通過(guò)呼吸道、腸粘膜、皮膚病變或泌尿生殖道進(jìn)入宿，NOI個(gè)遇到的就是在粘膜下組織中的巨噬細胞，它們通常是NOI個(gè)遇到病原體的防御細胞。一旦微生物進(jìn)入宿主并開(kāi)始復制，它就被其中一種吞噬細胞所識別，并被吞噬形成吞噬溶酶體，然后再經(jīng)過(guò)酸化和酶處理，產(chǎn)生高活性一氧化氮和超氧自由基來(lái)殺死病原體，這一過(guò)程稱(chēng)為吞噬作用。

     一般來(lái)說(shuō)，巨噬細胞可根據其功能和活化程度分為兩個(gè)亞型：經(jīng)典激活的M1巨噬細胞和交替激活的M2巨噬細胞。

M1巨噬細胞主要通過(guò)先天性和適應性免疫反應在Th1細胞募集、病原體抵抗和腫瘤控制中發(fā)揮作用，在免疫失調疾病例如系統性紅斑性狼瘡，多發(fā)性硬化癥，類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎等會(huì )有高量的M1巨噬細胞存在。

 交替激活的M2巨噬細胞在病原體寄生蟲(chóng)清除、抗炎反應和代謝、傷口愈合、組織重塑、免疫調節、腫瘤進(jìn)展和惡性腫瘤中發(fā)揮作用，與M2細胞典型相關(guān)疾病就是過(guò)敏和哮喘。

       作為免疫系統的一部分，巨噬細胞在對抗疾病方面的調節作用外，巨噬細胞在慢性炎癥、自身免疫性疾病和癌癥中也扮演著(zhù)消極的角色。在正常的免疫反應中，促炎性巨噬細胞受到調節，使得它們的促炎信號在數量和時(shí)間上受到限制。在長(cháng)時(shí)間的免疫損傷過(guò)程中，巨噬細胞不斷地分泌調節失調的細胞因子。這些過(guò)程持續慢性炎癥，被認為在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著(zhù)重要作用。

     一般研究巨噬細胞使用的就是流式細胞儀或是先用磁珠細胞分選產(chǎn)品((Dynabeads FlowComp Human CD14 Kit貨號11367D)從PBMC懸浮液中分離出CD14+單核細胞。分離的巨噬細胞可以進(jìn)一步培養和刺激，M1和M2極化的巨噬細胞可以通過(guò)用不同的細胞因子依次刺激單核細胞而獲得。用RPMI 1640培養基和10%FCS收獲的細胞可隨后用10ng/mL脂多糖（Invitrogen eBioscience lipopolysaccharide貨號00-4976-03）和50 ng/mL IFN-γ（Gibco-IFN-γ重組人蛋白，貨號PHC4031）獲得M1巨噬細胞或用20 ng/mL的IL-4（Gibco-IL4重組人蛋白，貨號PHC0041）。獲取M2/M2a巨噬細胞。用免疫復合物和IL-1b或LPS治療會(huì )導致M2b活化，而添加IL-10、TGF-b或糖皮質(zhì)激素會(huì )導致M2c活化。巨噬細胞類(lèi)型可通過(guò)流式細胞術(shù)在其表面的某些標記物的表達來(lái)識別及進(jìn)行功能研究，如下圖和表內所示。

          接著(zhù)巨噬細胞的細胞裂解物或細胞培養上清液可用于qPCR分析、western blotting或各種免疫分析如ELISA ，Invitrogen ProcartaPlex 多因子，Invitrogen ProQuantum高靈敏試劑盒分析各種細胞因子的變化。巨噬細胞功能也會(huì )通過(guò)吞噬試驗來(lái)研究，下表推薦了常用的吞噬實(shí)驗用試劑。

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