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目前國內標準胎牛血清的主要指標有以下幾點(diǎn):
1、內毒素 標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質(zhì)量也未見(jiàn)影響??梢?jiàn),內毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量*,預示著(zhù)已經(jīng)污染。
2、總蛋白含量 胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說(shuō)明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白 標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。
4、pH 國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。
5、微生物 包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等。隨著(zhù)國內血清廠(chǎng)家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難*清除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類(lèi)微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白 國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能*體現出采血的時(shí)的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它 不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測抗生素的(無(wú)四環(huán)素標準胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很?chē)栏?,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。
血源
市場(chǎng)上的標準胎牛血清血源血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。
1、國產(chǎn)血清,國內環(huán)境污染嚴重,同時(shí)飼養過(guò)程中抗生素極其濫用,有毒有害物質(zhì)會(huì )大量殘留在血清中,zui終不利于細胞的生長(cháng)。
2、南美血清,來(lái)源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,質(zhì)量參差不齊,當然,相對于國內血清來(lái)說(shuō)好的多。另外,國內銷(xiāo)售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。
3、北美血清,主要來(lái)自美國和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類(lèi)血清,等級越高的顏色越淡,表現為淡黃中帶一點(diǎn)微紅,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進(jìn)行干細胞培養。北美血清還有一個(gè)顯著(zhù)特點(diǎn)就是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠(chǎng)、藥廠(chǎng)尤為重要。
4、澳洲血清,來(lái)源主要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運之后進(jìn)入中國市場(chǎng)的,一般不具有溯源功能,由于生產(chǎn)、運輸等原因,價(jià)格相對來(lái)說(shuō)比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較,后者質(zhì)量等級更高,顏色更淡,性?xún)r(jià)比更高。
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