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細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營(yíng)養和促使細胞生殖增殖的基礎物質(zhì),也是培養細胞生長(cháng)和繁殖的生存環(huán)境。細胞培養基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過(guò)濾除菌,不同的培養基由于其營(yíng)養成份不同,滅菌方式也可能不同。細胞培養基的滅菌方式如下:1、高壓滅菌某些培養基(如MEM)可進(jìn)行高壓滅菌,這類(lèi)培養基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,一般是在培養基高壓滅菌后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)代替L-谷氨酰胺??筛邏簻缇呐囵B基在121℃、15psi,15分鐘的條件下...
一抗/二抗的操作步驟如下:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1、包被:用0.05MPH9.6碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。2、5%脫脂乳(SMP)或者BSA37℃(或者RT封閉)封閉1小時(shí)。棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。3、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性...
serana血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養物質(zhì),提供激素和各種生長(cháng)因子,提供結合蛋白,提供促接觸和生長(cháng)因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。serana血清的主要作用:1、提供基本營(yíng)養物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長(cháng)必須的物質(zhì)。2、提供激素和各種生長(cháng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素、類(lèi)固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(cháng)因...
BOVOGEN胎牛血清的使用注意事項:1、如果不能短期內使用完畢,解凍后適當分裝。血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此在分裝血清時(shí)須使分裝瓶預留一定體積空間,否則易導致分裝瓶?jì)隽讯l(fā)生污染。2、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過(guò)程中需有規則地搖晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補體。除非必須,一般不推薦對血清進(jìn)行熱處理。因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多,而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量。3、瓶裝解凍需采用緩慢解凍法:把在-15~-40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱...
雙證病毒采樣管用于臨床、流感(如H7N9)、手足口、麻疹、諾如、輪狀等病毒標本以及支原體、脲原體、衣原體標本的采樣和運輸;病毒及相關(guān)樣本的冷藏狀態(tài)下(2~8℃)的48小時(shí)內保存與運輸;病毒及相關(guān)樣本的-70℃環(huán)境或液氮環(huán)境中的長(cháng)時(shí)間保存。運輸儲存溫度、有效期①室溫(4~30℃)儲存運輸,有效期為12個(gè)月;②采樣后,滅活型保存液可室溫保存14天,非滅活型保存液在低溫(2~8℃)保存72h。雙證病毒采樣管的性能特點(diǎn):1、適用性:保存液能保持流感病毒、病毒、丙肝病毒等病毒樣品的穩定...
sigma胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。sigma胎牛血清在細胞培養方面通常優(yōu)于其他類(lèi)型的血清。由于胎牛從未接觸過(guò)外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發(fā)生交叉反應的風(fēng)險也較低,是理想的細胞生長(cháng)補充劑。胎牛血清應在-20℃儲...
Gemini胎牛血清是通過(guò)母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過(guò)濾技術(shù)和三級0.1µm終端微濾方法處理后,常用于細胞培養相關(guān)實(shí)驗。Gemini胎牛血清的作用:Gemini胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基,因為胎牛未進(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,故目前多數實(shí)驗人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細胞的體外培養,具有極為重要...
PAN胎牛血清的概述:在細胞培養過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的PAN胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實(shí)驗的結果,我們在實(shí)驗中使用10%的PAN胎牛血清ST30-3302,效果非常好。但是有些細胞也會(huì )使用5%的PAN胎牛血清南美或者20%的PAN胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的ChemicalbookPAN胎牛血清濃度。PAN胎牛血清的使用方法:在細胞培養過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的PAN胎牛血清濃度是...
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