人肝膽管癌細胞

人肝膽管癌細胞

細胞培養實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題總結：
1.一般客戶(hù)拿到細胞后，應該注意什么？客戶(hù)收到細胞后先不開(kāi)蓋，放在培養箱靜置若干小時(shí)后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議受收細胞后觀(guān)察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開(kāi)封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時(shí)如無(wú)異常情況，請在顯微鏡下觀(guān)察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制。
2.快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？
我們采用快遞發(fā)貨，一般外地2--3天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于4度的，則采用郵寄凍存細胞。
3.可否使用與原先培養條件不同之培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基，細胞大都無(wú)法立即適應，造成細胞無(wú)法存活。
4.可否使用與原先培養條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細胞培養上一個(gè)極為重要的營(yíng)養來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對于細胞的生長(cháng)會(huì )產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會(huì )造成細胞無(wú)法存活。 
5.培養基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養上一個(gè)極為重要的營(yíng)養來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì )對細胞的生長(cháng)會(huì )產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%，不要低于5%或高過(guò)20%，因為含量過(guò)低會(huì )導致細胞營(yíng)養不足，過(guò)高則會(huì )破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%，可以適量加減。
6. 何時(shí)須更換培養基？視細胞生長(cháng)密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換。
7.RBE人肝膽管癌細胞系購買(mǎi)的復蘇細胞，為何會(huì )有脫落？因為運輸的過(guò)程中不可避免的會(huì )有震蕩，收到后可以離心收集。
8.購買(mǎi)的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì )發(fā)生細胞數目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養時(shí)出現細胞數目太少，大都是因為離心過(guò)程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長(cháng)隔夜后再更換培養基即可。
人肝膽管癌細胞

9. 購買(mǎi)的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養時(shí)出現存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養基使用錯誤或培養基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。