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品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一周 |
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應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè) |
LoVo(人結腸癌細胞)保種心得:
首先,細胞采購的運輸形式一般分為兩種,一種是直接寄送凍存細胞,一種是復蘇后寄送活細胞。前者是由液氮中取出細胞凍存管,采用干冰運輸;后者是將細胞復蘇至T-25培養瓶中,采用常溫運輸。兩者各有優(yōu)缺點(diǎn),第1種方式的優(yōu)點(diǎn)是可以長(cháng)途運輸,因為細胞在干冰中相對穩定,一般可以保證數周之內不影響細胞活性,但缺點(diǎn)是運輸成本高,且細胞復蘇是很復雜的過(guò)程,如果細胞復蘇后狀態(tài)不佳,則很難界定是來(lái)源的問(wèn)題還是復蘇操作的問(wèn)題;而第二種方式的優(yōu)點(diǎn)是細胞收到后可以直接通過(guò)觀(guān)察來(lái)大體了解細胞狀態(tài),并且對運輸的要求相對較低,缺點(diǎn)則是只適合短途運輸,因為即便運輸時(shí)培養基中不添加血清,細胞還是會(huì )不斷增殖,當細胞長(cháng)滿(mǎn)后,細胞的狀態(tài)會(huì )隨時(shí)間的增加而不斷變差。綜上,如果是從國外大型細胞庫采購,一般采用第1種方法,既能適應長(cháng)途運輸,且大型細胞庫的凍存細胞質(zhì)量普遍較hao,在良hao的操作下復蘇成活率很高;如果是從國內細胞庫采購,則一般采用第二種方法,方便收到細胞時(shí)能較hao掌握細胞狀態(tài),并且降低運輸成本。
LoVo(人結腸癌細胞)分別針對兩種運輸方式來(lái)談下對新細胞的處理過(guò)程:
對于直接寄送凍存細胞的情況,首先要檢查的就是細胞收到后是否有足量剩余干冰,如果干冰不足,或是已經(jīng)沒(méi)有干冰,則細胞狀態(tài)可能會(huì )收到影響,建議盡快復蘇;如果有足量干冰,建議先轉移至-80℃冰箱過(guò)夜,于第二天按正常流程復蘇,即37℃水浴鍋中快速融解,低速離心后去除含DMSO的凍存液,換入適合細胞的新鮮培養基,輕柔吹勻后轉移至培養皿中,補足培養基;一般貼壁細胞在24h內即可觀(guān)察到細胞貼壁,從而判斷細胞狀態(tài),懸浮細胞則復蘇后即可觀(guān)察細胞狀態(tài)。對于凍存時(shí)間較長(cháng)的細胞,可能需要傳代1到2次后,細胞才會(huì )調整到正常狀態(tài),所以細胞復蘇后如果狀態(tài)不佳,不要灰心,仍要細心培養。
對于復蘇后寄送活細胞的情況,則細胞收到后要先檢查細胞瓶是否有破損,細胞瓶在運輸中很有可能受到碰撞和擠壓,導致瓶體受損。如果發(fā)現細胞瓶受損,則需要盡快處理,該棄就棄。如果細胞瓶完hao,則用酒精消毒瓶身,去除封口膜,然后置于37℃培養箱中靜置1-2h。待細胞穩定后,觀(guān)察細胞狀態(tài),并及時(shí)記錄,因為很多國內細胞庫都是可以反饋細胞狀態(tài)的,如果收到時(shí)細胞狀態(tài)不佳甚至污染,是可以要求重新寄送的。細胞如沒(méi)有異常,則盡快傳代并更換適合細胞的新鮮培養基。由于新細胞一般都是第1次接觸,細胞傳代過(guò)程中尤為需要注意胰酶消化時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短或過(guò)長(cháng)都會(huì )影響細胞狀態(tài),甚至導致細胞死亡。我建議大家采用低濃度胰酶消化,消化時(shí)縮短放培養箱和觀(guān)察的間隔時(shí)間,以便盡可能找到合適的消化時(shí)間。
上一產(chǎn)品:L02(HL7702)(QSG-7701)人正常肝細胞
下一產(chǎn)品:MCF-10A人正常乳腺上皮細胞
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