人正常肝細胞

人正常肝細胞傳代1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養瓶消毒，將其平躺置于培養箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無(wú)菌操作臺，打開(kāi)瓶口，將其中的培養液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)并置于細胞培養箱中培養，根據細胞生長(cháng)狀況及培養基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代，一般2天換一次液；

2.待細胞長(cháng)滿(mǎn)瓶底面積80%，需要對其進(jìn)行傳代，傳代比例為1:2到1:3；

3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于室溫預熱，倒掉培養瓶中的培養基，往培養瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶，置于室溫孵育消化（*次消化需置于顯微鏡下觀(guān)察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細胞脫落為zui佳消化時(shí)間，記錄zui佳消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后收集細胞懸液，1000rpm離心3min，棄上清，加入*培養基重懸細胞，進(jìn)行傳代。（具體根據隨貨說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作）

人正常肝細胞凍存條件：*培養基+FBS+DMSO

(備注：建議使用本公司的培養條件，用4度保存的冷凍液直接重懸細胞，不能預熱后使用。)

保存條件：液氮存儲