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從新藥研發(fā)角度來(lái)說(shuō),因口服給藥是經(jīng)濟的方式,在研究中。動(dòng)物實(shí)驗中,灌胃是口服給藥的方法,然而,看似簡(jiǎn)單的幾步,可對于初學(xué)者因為手法不當而傷到氣道或食道,進(jìn)而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實(shí)驗中,我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢?下面1起來(lái)看看!
灌胃: 借助器械(灌胃針)將藥物直接灌入動(dòng)物胃內;
藥物循環(huán)途徑:食管→胃→小腸→小腸毛細血管(吸收入血)→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門(mén)靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進(jìn)入血液循環(huán)。
灌胃給藥模式圖
特點(diǎn):
安q性高:各種給藥方式中,口服給藥是穩的;
可選的劑型比較多:只要保證藥物是均勻且穩定即可;
給藥體積大:小鼠:0.1-0.8ml(0.2 ml /10g);大鼠:1-3ml。
生物利用度低:藥物經(jīng)胃腸道吸收,并存在胃腸道首過(guò)代謝和肝臟首過(guò)代謝,生物利用率相對較低,僅為靜脈的25-30%;對于部分化合物吸收不恒定,誤差較大。
灌胃的實(shí)驗步驟
準備工具
8/9/12號灌胃針頭配套1.0 ml注射器;如下圖為9號灌胃針頭/1.0 ml注射器,為了防止插入時(shí)造成損傷,針頭呈倒水滴型。
注射器
注:
灌胃針的分類(lèi):如下圖為小鼠灌胃常見(jiàn)灌胃針類(lèi)別,根據尺寸不同有8/9/12號;另外還有直頭和彎頭區別;
灌胃針的選擇:尺寸大小的選擇1般可根據小鼠的年幼決定,如<30g,建議用8、9號;30g以上可選擇12號;其中9號針頭直徑小于常規的大頭,特別適用幼鼠;直頭彎頭可根據個(gè)人習慣選擇,初學(xué)者建議先適用彎頭練習;
灌胃針的獲取:可直接購買(mǎi),不建議手動(dòng)處理的注射器針頭,易刺傷小鼠食道;
灌胃針的深度:因為動(dòng)物有個(gè)體差異,實(shí)驗前可先測量小鼠口腔至胃的距離,進(jìn)而選擇合適長(cháng)度的灌胃針,避免插入過(guò)深或過(guò)淺。小鼠入針1般3-4cm,大鼠一般4-6cm。
操作步驟
固定小鼠:用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚,用左手的無(wú)名指和小指夾其背部皮膚和尾部,使其頭、頸和身體在1條直線(xiàn);若第1次抓取時(shí)不得當,1定要放開(kāi)重抓,以免影響后續操作;
進(jìn)針:右手持注射器(1ml的注射器配灌胃針頭),從1側嘴角進(jìn)針,輕壓舌根,輕輕向前推,進(jìn)入食管后會(huì )感覺(jué)有個(gè)刺空感,緩慢推進(jìn),1般當針插入小鼠3~4cm,即灌胃針的3/4時(shí)即可注射;
注意: 若感到阻力或動(dòng)物掙扎比較厲害時(shí),說(shuō)明插錯位置,應馬上停止進(jìn)針或將針拔出;待動(dòng)物恢復平靜后,再次嘗試。
常見(jiàn)問(wèn)題解答
灌胃后,為何小鼠死亡?
主要考慮2種原因,① 因為小鼠的氣管靠近食管,若灌胃針誤入氣管,藥物會(huì )進(jìn)入氣管導致小鼠當場(chǎng)窒息死亡;②刺傷食道:若入針不當,損傷或穿破食管,會(huì )導致小鼠逐漸消瘦并死亡。
灌胃時(shí)為了避免小鼠死亡,應該注意?
要主要正確抓取和插入。抓取時(shí):小鼠體位一定要保持,頭、頸部及身體1條線(xiàn),盡量保證插入的是食管而不是氣管。插入時(shí):嘴角進(jìn)針,然后豎直向下,先試探性的稍微用力,慢慢向下,1旦感覺(jué)有阻礙就得停止,針無(wú)阻力才可注射。
大鼠灌胃和小鼠區別主要在于哪里?
大鼠操作步驟與小鼠基本一樣,但因大鼠個(gè)體很大,易掙扎,所以難度更大,所以1定要準確抓??;另外灌胃針型號不樣,多用16號,20號適合更大型大鼠,并根據注射藥物的量配套2或5ml的注射器
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