實(shí)驗qPCR.熒光定量

實(shí)驗qPCR.熒光定量

qPCR熒光定量是指在反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

　　qPCR熒光定量技術(shù)不僅實(shí)現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，qPCR熒光定量具有特異性更強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，已成為*的核酸分子定量的標準方法，目前在基因表達研究和臨床疾病檢測等領(lǐng)域已得到廣泛應用（如轉基因動(dòng)植物檢測、RNAi基因失活率檢測、病原微生物或病毒含量檢測、基因差異表達、基因分型）。

實(shí)驗qPCR.熒光定量

 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈式反應（PCR）指的是在PCR進(jìn)行的同時(shí)，對其過(guò)程進(jìn)行監測的能力（即實(shí)時(shí)）。因此，數據可在PCR擴增過(guò)程中，而非PCR結束之后，進(jìn)行收集。這為基于PCR的DNA和RNA定量方法帶來(lái)了革命性的變革。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)中，反應以循環(huán)中*檢測到目標擴增的時(shí)間點(diǎn)為特征，而非在一定循環(huán)數后目標分子累計的擴增量。目標核酸的起始拷貝數越高，則會(huì )越快觀(guān)察到熒光的顯著(zhù)增加。相反，終點(diǎn)法檢測（也稱(chēng)“讀板檢測”）測量的是PCR循環(huán)結束時(shí)累計的PCR產(chǎn)物量