人胃癌細胞

人胃癌細胞購買(mǎi)細胞注意事項：

1. 收到細胞后*先觀(guān)察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，SNU-1；人胃癌細胞了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養過(guò)夜，隔天再取出觀(guān)察。此時(shí)多數細胞均會(huì )貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實(shí)細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無(wú)活力，請拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于技術(shù)部溝通交流。"    P4

    包裝規格：    復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

    細胞規格：    1*10(5)/ml——1*10（6）/ml

    安全水平：    1

    細胞種屬：    人

    組織來(lái)源：    胃

    細胞形態(tài)：    上皮細胞樣

    細胞特性：    貼壁

    細胞融合度：    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

    細胞檢測：    細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

    "細胞培養三不要：

養科研細胞是生物醫學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗可以和大家分享一下：

1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jì)?。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養基中的碳酸就會(huì )轉化成二氧化碳，釋放出來(lái)。培養基中的碳酸少了，當然會(huì )變堿。如果不燒瓶口的話(huà)，你會(huì )發(fā)現培養液變堿的速度會(huì )大大減慢。（當然多多少少還是會(huì )有一點(diǎn)越用越堿，因為室溫還是比冰箱內的溫度高）

其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會(huì )發(fā)現根本就不會(huì )燒疼。如果有細菌的話(huà)，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)美國以后發(fā)現這里更*，超凈臺內根本就不點(diǎn)酒精燈。

2. 不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養細胞就像養孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養不好，就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細胞對細胞的生長(cháng)沒(méi)有任何好處，SNU-1；人胃癌細胞特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養基中的生長(cháng)因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(cháng)的因子在其周?chē)?，形成有利于生長(cháng)的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長(cháng)不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長(cháng)。

3. 不要怕消化。在傳代的時(shí)候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過(guò)度，早早地終止消化。細胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈，吹得滿(mǎn)瓶子都是氣泡。在我看來(lái)，用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時(shí)候，37度消化過(guò)夜，細胞也沒(méi)事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有，動(dòng)作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的。"    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    傳代方法：    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件：    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    主要文獻：    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

細胞接收后的操作流程與注意事項：

1、如果細胞為貼壁細胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時(shí)原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒(méi)有出現增值而是繼續脫落死亡，請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗室技術(shù)人員會(huì )跟進(jìn)解決

2、貼壁細胞生長(cháng)緩慢；適當提高血清濃度（*高不能超過(guò)20%），或可根據該細胞生長(cháng)密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養

3、生長(cháng)不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長(cháng)，可將細胞進(jìn)行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進(jìn)行培養

細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無(wú)菌操作）

1、吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?-2min）

2、鏡下觀(guān)察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6-8ml*培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散

3、取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養

4、SNU-1；人胃癌細胞注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

特別注意：（如使用公共實(shí)驗室或者初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）人胃癌細胞