人肝癌細胞

人肝癌細胞購買(mǎi)細胞注意事項：

1. 收到細胞后*先觀(guān)察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養過(guò)夜，隔天再取出觀(guān)察。NCI-H226人肺鱗癌細胞此時(shí)多數細胞均會(huì )貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實(shí)細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無(wú)活力，請拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于技術(shù)部溝通交流。"    P4

    包裝規格：    復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

    細胞規格：    1*10(5)/ml——1*10（6）/ml

    安全水平：    1

    細胞種屬：    人

    組織來(lái)源：    肺

    細胞形態(tài)：    上皮細胞樣

    細胞特性：    貼壁

    細胞融合度：    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

    細胞檢測：    細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

    "細胞培養三不要：

養科研細胞是生物醫學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗可以和大家分享一下：

1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jì)?。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養基中的碳酸就會(huì )轉化成二氧化碳，釋放出來(lái)。培養基中的碳酸少了，當然會(huì )變堿。如果不燒瓶口的話(huà)，你會(huì )發(fā)現培養液變堿的速度會(huì )大大減慢。（當然多多少少還是會(huì )有一點(diǎn)越用越堿，因為室溫還是比冰箱內的溫度高）

其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會(huì )發(fā)現根本就不會(huì )燒疼。如果有細菌的話(huà)，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)美國以后發(fā)現這里更*，超凈臺內根本就不點(diǎn)酒精燈。

2. 不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養細胞就像養孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養不好，就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細胞對細胞的生長(cháng)沒(méi)有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養基中的生長(cháng)因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(cháng)的因子在其周?chē)?，形成有利于生長(cháng)的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長(cháng)不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長(cháng)。

3. 不要怕消化。NCI-H226人肺鱗癌細胞在傳代的時(shí)候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過(guò)度，早早地終止消化。細胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈，吹得滿(mǎn)瓶子都是氣泡。在我看來(lái)，用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時(shí)候，37度消化過(guò)夜，細胞也沒(méi)事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有，動(dòng)作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的。"    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    傳代方法：    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件：    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    主要文獻：    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

有關(guān)實(shí)驗室細胞培養基知識普及：
經(jīng)典的培養基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用*廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。
MEM是由Eagle’s基礎培養基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度。
BEM(DMEM)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的，現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。*初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來(lái)為了某些細胞的生長(cháng)需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類(lèi)型，包括對營(yíng)養成分要求苛刻的細胞。
Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
RPMI 1640培養基是專(zhuān)為淋巴細胞培養而設計的，現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。
干粉培養基：以前大部分實(shí)驗室都是用干粉培養基，但配制過(guò)程就較為繁瑣，要溶解、調pH值，過(guò)濾，過(guò)程中可能會(huì )產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實(shí)驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養的**會(huì )有差異。如果使用液體培養基，這種人為的誤差會(huì )減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會(huì )很小。大家是不是感覺(jué)液體培養基會(huì )貴很多，以前是這樣，但現在大家都認同了。 
無(wú)血清培養基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長(cháng)因子或細胞因子。NCI-H226人肺鱗癌細胞無(wú)血清培養基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長(cháng)因子、必需的營(yíng)養物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來(lái)的不利因素，使細胞培養的條件更穩定。但它也不是**的，從有血清培養過(guò)渡到無(wú)血清培養的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長(cháng)因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí)，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價(jià)格也比普通的培養基貴很多。?C7132    OACP4C細胞株    ，公司提供背景資料、生物體、生長(cháng)特性、來(lái)源、器官、類(lèi)型、形態(tài)、培養條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說(shuō)明書(shū)信息，我們擁有豐富的細胞系培養經(jīng)驗，能提供細胞培養全fang位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗再無(wú)煩擾！人肝癌細胞