人尤文氏肉瘤細胞

人尤文氏肉瘤細胞分離培養法

分離培養法是支原體檢測的金標方法，其檢測精確度zui高。這種方法是從可疑的細胞培養體系中取樣，并接種到zui適宜支原體生長(cháng)的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會(huì )在這種瓊脂平板上*生長(cháng)，zui終形成明顯可見(jiàn)的特征性菌落。分離培養法基本不會(huì )出現假陰性結果，因此被譽(yù)為支原體檢測金標準。不過(guò)分離培養法也存在兩個(gè)弊端，一是檢測時(shí)間太長(cháng)，支原體要長(cháng)出明顯克隆至少需要4周時(shí)間。二是盡管可以檢測絕大多數支原體種類(lèi)，分離培養法也有力所不及的時(shí)候，例如支原體M. hyorhinis。

人尤文氏肉瘤細胞DNA檢測

DNA檢測需要將可疑樣品與指示細胞共同培養，因此一般需要幾天時(shí)間。DNA檢測所用的指示細胞通常是細胞質(zhì)區域較大的Vero細胞，如果原樣本中含有支原體，那么當細胞DNA被熒光染料（如Hoechst染料）染色時(shí)，就可以在指示細胞的核周?chē)^(guān)察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒。分離培養法用來(lái)檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠，而DNA法可以準確的將其檢測出來(lái)。

PCR法

PCR法也可以檢測M. hyorhinis菌株，PCR法檢測支原體只需幾個(gè)小時(shí)，是zui快但也是zui不靈敏的支原體檢測方法。該方法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本，其中PCR引物通常針對支原體的16S rRNA基因。在凝膠電泳過(guò)程中，支原體DNA會(huì )顯示為特異性條帶，以此指示支原體的存在。PCR法可以檢測大多數支原體，但謹慎起見(jiàn)同時(shí)使用另一種檢測方法來(lái)進(jìn)行驗證。

酶學(xué)檢測和ELISA

此外，也還存在一些其他支原體檢測方法。例如酶學(xué)檢測是將可疑樣本添加到特定底物中，在這一體系內支原體的酶可以將ADP轉化為ATP，隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測，以ELISA法為基礎的支原體檢測一般使用針對支原體16S rRNA基因的帶標記探針或抗體，來(lái)檢測培養物中是否含有支原體。

定期檢測

支原體感染會(huì )使培養細胞慢慢枯萎，因此對培養細胞定期進(jìn)行支原體檢測非常重要。一般來(lái)說(shuō)每1至3個(gè)月就應該進(jìn)行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規化堅持下去，是細胞培養實(shí)驗室應對支原體感染的關(guān)鍵。