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應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè) |
Q1. 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞液體培養基的保存是冷藏好?還是冷凍好?
要冷藏??!因為液體培養基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí),其溶液的pH值會(huì )發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會(huì )受到影響對細胞生長(cháng)不利。故液體培養基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。
Q2.人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞 液體培養基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細胞生長(cháng)不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時(shí),應重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺?;A醫學(xué)細胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養基中,其終濃度為2mM/ml培養基。包裝為粉紅色,-24?C保存。
Q3.細胞計數及存活測試
1、原理:
(1)計算細胞數目可用血球計數盤(pán)或是Coultercounter粒子計數器自動(dòng)計數。
(2)血球計數盤(pán)一般有二個(gè)chambers,每個(gè)chamber中細刻9個(gè)1mm2大正方形,其中4個(gè)角落之正方形再細刻16個(gè)小格,深度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片后,每個(gè)大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時(shí),計數每個(gè)大正方形內之細胞數目,乘以稀釋倍數,再乘以104,即為每ml中之細胞數目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會(huì )滲入死細胞中而呈色,而活細胞因細胞膜完整,染料無(wú)法滲入而不會(huì )呈色。一般使用藍色之trypan blue染料,如果細胞不易吸收trypan blue,則用紅色之Erythrosin bluish。計算細胞活率:活細胞數/(活細胞數+死細胞數)×100%。計數應在臺盼蘭染色后數分鐘內完成,隨時(shí)間延長(cháng),部分活細胞也開(kāi)始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,用不含血清的稀釋液,可以使染色計數更為準確。
上一產(chǎn)品:SW480人結腸癌細胞
下一產(chǎn)品:ZR-75-1人乳腺癌細胞
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