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人肺腺癌細胞

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人肺腺癌細胞1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jì)?。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會(huì )轉化成二氧化碳,釋放出來(lái)。培養基中的碳酸少了,當然會(huì )變堿。如果不燒瓶口的話(huà),你會(huì )發(fā)現培養液變堿的速度會(huì )大大減慢。(當然多多少少還是會(huì )有一點(diǎn)越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)

其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會(huì )發(fā)現根本就不會(huì )燒疼。如果有細菌的話(huà),這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)美國以后發(fā)現這里更*,超凈臺內根本就不點(diǎn)酒精燈。

2. 不要頻繁看細胞。SPC-A-1人肺腺癌細胞對于初學(xué)者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細胞對細胞的生長(cháng)沒(méi)有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養基中的生長(cháng)因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(cháng)的因子在其周?chē)?,形成有利于生長(cháng)的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長(cháng)不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長(cháng)。

3. 不要怕消化。在傳代的時(shí)候,初學(xué)者往往生怕細胞消化過(guò)度,早早地終止消化。細胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,吹得滿(mǎn)瓶子都是氣泡。在我看來(lái),用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時(shí)候,37度消化過(guò)夜,細胞也沒(méi)事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有,動(dòng)作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。"    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    傳代方法:    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件:    詳見(jiàn)細胞說(shuō)明書(shū)

    主要文獻:    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

細胞培養相關(guān)培養基選購基本指南:
如何選擇培養基:經(jīng)常聽(tīng)到有人問(wèn),這種細胞該用哪一種培養基呢?其實(shí)這個(gè)問(wèn)題的答案可以很簡(jiǎn)單,也可以好復雜。為什么這樣說(shuō)呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡(jiǎn)單,問(wèn)供應商就行了?;蛘哒业较嚓P(guān)的文獻,作為參考。
培養基這么多種,要選擇起來(lái)也是個(gè)頭疼的事情。除了部分培養基是公開(kāi)配方的,或者是專(zhuān)門(mén)針對某一種細胞的,如昆蟲(chóng)基本培養基和神經(jīng)祖細胞基礎培養基, 但是大部分液體培養基都是專(zhuān)li配方的,也就是說(shuō)其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養來(lái)選出*合適的培養基。畢竟實(shí)踐出真知。
怎么樣才可以買(mǎi)到好的培養基產(chǎn)品:*先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區域的品牌代理商,針對自己所養的細胞,供應商該選用哪種的培養基進(jìn)行培養,這樣就可以買(mǎi)到好的而且適合自己的培養基產(chǎn)品。
關(guān)于培養基品牌,目前公司所知道的高校實(shí)驗室有些同學(xué)在用Corning系列培養產(chǎn)品,也有同學(xué)在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。

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