人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株

人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株客戶(hù)收到細胞先不開(kāi)蓋，放在培養箱靜置若干小時(shí)后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議受收細胞時(shí)的培養基拍一張照片，觀(guān)察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；

一、 細胞在培養瓶中培養至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)*培養液并封好瓶口是細胞運輸的*辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實(shí)驗室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無(wú)菌操作。

二、 鏡下觀(guān)察：

未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將瓶裝的*培養液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，放入37℃、5%CO2孵箱培養；

超過(guò)80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀(guān)察，等細胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后，加培養基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株