人結腸癌奧沙利鉑耐藥細胞

人結腸癌奧沙利鉑耐藥細胞特性：

安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下zui好是在4X物鏡)觀(guān)察整個(gè)細胞生長(cháng)情況。

（一）如果細胞未長(cháng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶，吸出培養液，換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長(cháng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱，之后翻轉培養瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加*培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。

人結腸癌奧沙利鉑耐藥細胞注意事項：

1、觀(guān)察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jì)取?/span>

4、收到細胞后，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時(shí)與我們。