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RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

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詳細介紹
品牌其他品牌貨號R323
規格100rxn供貨周期現貨
主要用途更高效的兩步法RT-qPCR預混液(去基因組)應用領(lǐng)域醫療衛生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè)

RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

 

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

更高效的兩步法RT-qPCR預混液(去基因組)

簡(jiǎn)便快捷的操作:5 × HiScript®III qRT SuperMix包含逆轉錄反應所需的所有組分,只需加入模板 RNA,20 min內即可完成逆轉錄反應

廣泛的模板兼容性:可兼容不同物種,完整度較差的 RNA 模板

*的雜質(zhì)耐受度:對于逆轉錄常見(jiàn)雜質(zhì)如乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸等,具有*的耐受度

的逆轉錄效率:與常見(jiàn)市售逆轉錄產(chǎn)品相比,HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) 逆轉得到的cDNA定量CT值小,具有的逆轉錄效率

1.簡(jiǎn)便快捷的操作

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(Vazyme #R323)包含基因組清除模塊,可*去除 RNA 模板中殘留的基因組 DNA;同時(shí)Vazyme #R323 包含逆轉錄反應所需的所有組分,只需加入模板 RNA,20 min 內即可完成逆轉錄反應,操作簡(jiǎn)便快捷。

2.廣泛的模板兼容性

分別以 HeLa 細胞、小鼠肝臟、擬南芥葉片的完整 RNA 與降解 RNA 為模板,使用 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme#R323)以及市售常見(jiàn)品牌逆轉錄試劑 (Supplier T) 進(jìn)行逆轉錄。將得到的 cDNA 進(jìn)行多個(gè)基因的 qPCR 定量分析,以不同基因為橫坐標,擴增 CT 值為縱坐標繪圖,比較不同產(chǎn)品的逆轉錄效率。從圖中可以看出,以 HeLa 細胞、小鼠肝臟、擬南芥葉片完整 RNA 以及降解 RNA 為模板進(jìn)行逆轉錄定量,Vazyme #R323的擴增CT 值小于或等于T公司相關(guān)產(chǎn)品,說(shuō)明Vazyme #R323逆轉不同物種RNA、完整度較差的RNA模板皆具有的逆轉錄效率。

3. *的雜質(zhì)耐受度

在RNA的提取過(guò)程中常常因操作或樣本的特殊性導致RNA中混有有機試劑或雜質(zhì),這些物質(zhì)的殘留會(huì )嚴重影響逆轉錄效率。乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸是 RNA 提取過(guò)程中較為常見(jiàn)的雜質(zhì),測試其對逆轉錄效率的影響。

分別對上述 5 種雜質(zhì)設置 3 個(gè)不同濃度梯度,添加至 HiScript ® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme #R323) 逆轉錄體系中,將得到的 cDNA 進(jìn)行 qPCR 檢測。以不同濃度雜質(zhì)為橫坐標,△CT  (△CT = 含雜質(zhì)逆轉錄 cDNA 擴增 CT 值 – 未含雜質(zhì)逆轉錄 cDNA 擴增 CT 值 ) 為縱坐標繪圖。從圖中可以看出,△CT 均小于 0.15,說(shuō)明 Vazyme #R323 對上述 5 種常見(jiàn)雜質(zhì)具有*的耐受度。

4. 的逆轉錄效率

以 100 ng HeLa RNA 為模板,使用 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper) (Vazyme #R323) 以及市售其他逆轉錄產(chǎn)品 ( 分別來(lái)自Supplier Ta、Th1、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti),按照各自說(shuō)明書(shū)推薦程序進(jìn)行逆轉錄反應。將得到的 cDNA 進(jìn)行多個(gè)基因的 qPCR 定量分析。以不同公司產(chǎn)品為橫坐標,△CT (△CT = Vazyme #R323 cDNA 擴增 C值 – 各公司逆轉錄產(chǎn)品 cDNA 擴增 CT 值 ) 為縱坐標繪圖。從圖中可以看出,除一些體系Th1 △CT >0 外,其余公司逆轉錄產(chǎn)品均△CT <0,說(shuō)明 Vazyme #R323 逆轉錄效率優(yōu)于 Ta、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti 相關(guān)逆轉錄產(chǎn)品。

   

HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)為HiScript® II二代產(chǎn)品的升級產(chǎn)品,包含全新升級三代逆轉錄酶 HiScript® III Reverse Transcriptase與針對逆轉錄特殊優(yōu)化的適 Buffer,進(jìn)一步提高了cDNA合成效率。本產(chǎn)品包含基因組清除模塊,可*去除 RNA 模板中殘留的基因組 DNA,確保后續定量結果更加真實(shí)可靠。與此同時(shí),本產(chǎn)品將所有逆轉錄反應所需組分融于一管,只需加入模板 RNA,20 min 內即可完成逆轉錄反應,同時(shí)終止gDNA wiper作用,保證cDNA的完整性,并減少操作步驟,有效防止在操作過(guò)程中帶來(lái)的污染。

組分

R323-01 (100 rxn)

RNase-free ddH2O

2 ×1 ml

4 ×gDNA wiper Mix

400 μl

5 ×HiScript III qRT SuperMixa

400 μl

5 ×No RT Control Mixb

40 μl

a. 包含Buffer、dNTP、HiScript®III Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo (dT)20VN primer mix。

b. 除不含HiScript®III Reverse Transcriptase外,其余成分與5 × HiScript®III qRT SuperMix 相同,用于配制No RT對照反應。

- 30℃~- 15℃保存。

RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

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