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細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染，微生物則會(huì )大量繁殖，培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀(guān)察細胞，生長(cháng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現可能與以下幾種情況有關(guān)：
(1)細胞生長(cháng)過(guò)老，破碎的細胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好，反復凍融的結果;
(3)配制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長(cháng);
(4)配制培養基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養原代細胞中出現小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。

細胞培養中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數。
(2) 培養基無(wú)需37℃水浴。
(3) 培養基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴格控制配制培養基的水質(zhì)，容器定期刷洗。
(5) 掌握細胞傳代的*時(shí)機，細胞切勿生長(cháng)過(guò)老。

小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?

血清保存和使用須注意：血清應保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí) ，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會(huì )增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。

胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三種之間的區別：

這三種血清的成份，總體沒(méi)有什么明顯差別，只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān)，如上述有人說(shuō)的抗體等很少。此外，因生長(cháng)發(fā)育的需要，有些成分在小牛出生后會(huì )發(fā)生一些變化。不過(guò)還沒(méi)有搞清楚它與其它的血清之間的差別。有一點(diǎn)可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。

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