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qPCR熒光定量

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AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix(qPCR熒光定量

圖1.廣闊的定量閾

以HeLa 細胞cDNA 為稀釋液,將pUC19 質(zhì)粒進(jìn)行7 個(gè)10 倍梯度稀釋?zhuān)? 個(gè)稀釋梯度中質(zhì)??截悢禎舛燃s為7 copies/4 μl。使用AceQ® Universal 預混液對各稀釋梯度中的pUC19 質(zhì)粒進(jìn)行檢測,每孔模板使用量為4 μl??梢钥吹?,AceQ®Universal預混液在寬廣的模板量區間內具有很好的線(xiàn)性關(guān)系,可輕松檢測出個(gè)位數拷貝的待測模板。

圖2.的特異性

對隨機選取的38 個(gè)體系進(jìn)行qPCR 檢測,驗證AceQ® Universal預混液擴增特異性。通過(guò)對融解曲線(xiàn)分析可知,38 個(gè)體系均無(wú)非特異性擴增。說(shuō)明AceQ® Universal 預混液擁有的特異性。

圖3.全平臺通用

使用AceQ® Universal 預混液在不同類(lèi)型的qPCR 儀(機型:StepOnePlusTM、QuantStudioTM 3、LightCycler® 96)上擴增GAPDH 基因,定量結果好。說(shuō)明AceQ® Universal 預混液儀器適用性廣,無(wú)需針對不同儀器調整ROX 濃度。

本產(chǎn)品是使用SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行qPCR的試劑,采用化學(xué)法修飾的熱啟動(dòng)DNA聚合酶AceTaq® DNA Polymerase,配合針對qPCR優(yōu)化的適Buffer,可以有效抑制非特異擴增,從而顯著(zhù)提高擴增效率,適用于進(jìn)行高靈敏度的qPCR反應。本產(chǎn)品是一種含有qPCR反應適濃度SYBR Green I的2 × 預混試劑,可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線(xiàn),對靶基因進(jìn)行準確定量、檢測,重復性好,可信度高。另外,產(chǎn)品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,適應于所有qPCR儀器,無(wú)需在不同儀器上調整ROX的濃度,只需在配制反應體系時(shí)加入引物和模板即可進(jìn)行擴增。

 qPCR熒光定量 

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