在細胞培養過(guò)程中，經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，z常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續實(shí)驗的結果，我們在實(shí)驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞，效果非常好。但是有些細胞也會(huì )使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根據具體細胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。
1、需要長(cháng)期保存的Gibco牛血清，例如Gibco胎牛血清，必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì )被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40～45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽选?/div>
2、一般廠(chǎng)商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現Gibco牛血清有懸浮物,例如gibco澳洲胎牛血清中發(fā)現有懸浮物，則可將血清加入培養液內一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
3、瓶裝Gibco胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過(guò)程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀。
4、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多,而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進(jìn)淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
5、血清中的沉淀物和絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀(guān)察象"小黑點(diǎn)",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì )影響細胞生長(cháng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
以上便是今天關(guān)于gibco澳洲胎牛血清的保存方式也不是我們想象的那么復雜嗎的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。
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