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一文讀懂:gibco澳洲胎牛血清的使用方法和保存方法

更新時(shí)間:2019-12-02瀏覽:1080次

   gibco澳洲胎牛血清的使用方法:

  在細胞培養過(guò)程中,經(jīng)常加入的胎牛血清,常使用gibco澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實(shí)驗的結果,我們在實(shí)驗中使用10%的gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會(huì )使用5%的GibcoFBS或者20%的gibco澳洲胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的gibco澳洲胎牛血清濃度。
  gibco澳洲胎牛血清的保存方法:
  1、需要長(cháng)期保存的gibco澳洲胎牛血清必須儲存于低溫冰箱中。冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在高溫放置太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì )被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽选?/div>
  2、一般廠(chǎng)商提供的gibco澳洲胎牛血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
  3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝。在溶解過(guò)程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀。
  4、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多,而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進(jìn)淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
  5、gibco澳洲胎牛血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量??捎秒x心,5分鐘去除,也可不用處理。顯微鏡下“小黑點(diǎn)”:經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀(guān)察象“小黑點(diǎn)”,常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì )影響細胞生長(cháng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。

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