如何解凍sigma試劑血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損
sigma試劑血清取自出生24小時(shí)之內的新生牛,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。
sigma試劑血清含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,常用于動(dòng)物細胞的體外培養,具有極為重要的功能,其作用如下:
1.提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
已通過(guò)內毒素和血紅蛋白檢測應用源自凝血的FBS是在真核生物,特別是哺乳動(dòng)物細胞培養物中z廣泛使用的未定義的補充物。
保存sigma試劑血清的方法?
我們建議sigma試劑血清應保存在-5℃至-20℃。需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃至–70℃低溫冰箱中。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。由于sigma試劑血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此,sigma試劑血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽选?/div>
如何解凍sigma試劑血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您采用逐步解凍法:將-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清取出后先置于2℃-8℃冰箱中使之融解,然后移入室溫待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需輕輕規則地搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀。如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì )增加,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。
sigma試劑血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
sigma試劑血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由于sigma試劑血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會(huì )存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將sigma試劑血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞您的過(guò)濾膜。
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